96孔板病毒DNAout(真空法)
96孔板病毒DNAout(真空法)低于1.7,考虑RNA降解,*常见的原因是RNA酶去除不彻底。
建议你1.EP管和tip用DEPC水泡,如果来不及也可以买现成的。
2.提取时注意低温,防止RNA降解。
3.洗涤用的75%酒精用DEPC水配制,*后融解RNA的水也应是DEPC水,或去RNA酶水。
4.提取的RNA尽快转录成cDNA,-70度保存时间不宜过长(一般不超过一个月)。
96孔板病毒DNAout(真空法)提RNA提取秘诀:
1.提取RNA过程应该尽量快,不要太过仔细,以减少RNA的降解
2.在吸取上清液时要小心,离心管尽量不要抖动和倾斜,保持其从离心机里拿出来的角度吸取,加入异丙醇的那一步要尤其小心,上清液不要贪多
3.96孔板病毒DNAout(真空法)干燥时不要太过
4.你跑的电泳是不是普通的琼脂糖凝胶电泳?这个结果不是很准确,因为在跑胶的过程当中RNA也会降解,但并不一定你提取的RNA效果不好,一般情况下跑出来的电泳结果有3条带,2000bp,1000bp,100多的位置各有一条带,分别是28s,18s,5s,如果5S很亮,表示RNA降解
5.提完的RNA可以做反转录,96孔板病毒DNAout(真空法)然后用管家基因检测,只要能扩出明亮的条带即对你的实验没有影响。注意:在用管家基因检测时应增加循环数,以检测是否有DNA污染。
齿驰100806贰补谤濒别溶液100尘尝齿驰91105贬补苍办蝉溶液100尘尝齿驰100927顿-贬补苍办蝉溶液100尘尝齿驰100215笔叠厂缓冲液(10×)250尘尝齿驰100807杜氏笔叠厂溶液,10×100尘尝齿驰90306胰酶消化液250尘尝(础)触250尘尝(叠)齿驰100301秋水仙素溶液1尘尝齿驰130819叠辞耻颈苍固定液2尝齿驰131223窜别苍办别谤固定液2尝齿驰131224贬别濒濒测固定液2尝齿驰131225颁补谤苍辞测固定液2尝齿驰131200细胞计数液(痴颈-颁贰尝尝仪专用)100次齿驰辫测箩19细胞培养基1套XYygtz22荧光探针和示踪剂1瓶XYfly100细胞分离液1瓶XYydyz23细胞凋亡诱导剂和抑制剂1瓶XY100407人**细胞分离液A型100mLXY90307青链霉素溶液100mLXY131134Percoll100mLXY131136Ficoll-Paque介质100mLXY100601细胞核微量制备试剂盒50次XY111207动物线粒体纯化试剂盒15次(A)|15次(B)XY111208植物线粒体纯化试剂盒15次(A)|15次(B)XY120308植物叶绿体纯化试剂盒15次XY100410超快转染试剂盒1mLXY130821阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂100次|500次XY111105MTT检测试剂盒500次XY121205CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒5mLXY81026一站式生物素检测TUNEL试剂盒(DAB法)10次XY81025双染细胞凋亡检测试剂盒25次|50次XY130596荧光染色细胞凋亡检测试剂盒200次XY130862DAPI干粉10mgXY130863碘化丙啶干粉10mgXY130864Hoechst 33258干粉10mgXY130865Hoechst 33342干粉10mgXY130595双荧光素酶活性检测试剂盒100次XY130597萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒100次XY130598海肾荧光素酶活性检测试剂盒100次XY131012萤火虫荧光素1mLXY131019无内**萤火虫荧光素25mgXY130599β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒300次XY130802ADP/ATP发光法细胞活力检测试剂盒200次XY130801ATP发光法细胞活力检测试剂盒200次XY121104增强型天狼猩红染色试剂盒100mLXY121105茜素红S染色试剂盒100mLXY130822苏木素染色液15ml