Indian Ink技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Indian Ink这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
Indian Ink根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
Indian Ink以上述叁个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
叁、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
Indian Ink客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。次(B)XY100101镍柱介质2mL|10mLXY131057钴柱介质10mLXY120801镍柱原位再生试剂盒20次XY100202兔抗His标签多抗,HRP标记100μLXY111116一站式GST标记蛋白质微量纯化套装20次(A)|20次(B)XY120101谷胱甘肽琼脂糖2mLXY120705L-谷胱甘肽(还原型)5gXY120534兔抗GST标签多抗20μLXY120535HRP标记的兔抗GST标签多抗20μLXY130871一站式MBP标签蛋白纯化套装20次XY130573小鼠抗His标签单抗100μLXY130574小鼠抗Flag标签单抗100μLXY130575小鼠抗c-Myc标签单抗100μLXY130576小鼠抗HA标签单抗100μLXY130577小鼠抗GST标签单抗100μLXY130578小鼠抗V5标签单抗100μLXY130579小鼠抗MBP标签单抗100μLXY130580小鼠抗GFP标签单抗100μLXY130581小鼠抗mCherry标签单抗100μLXY130582小鼠RFP标签单抗100μLXY130583小鼠抗VSV-G标签单抗100μLXY130584小鼠抗T7标签单抗100μLXY130585小鼠抗CBP标签单抗100μLXY130586小鼠抗HSV标签单抗100μLXY130587小鼠抗E2标签单抗100μLXY130588小鼠抗S1标签单抗100μLXY130589小鼠抗Tag-100标签蛋白单抗100μLXY130590小鼠抗HPC4标签蛋白单抗100μLXY130591小鼠抗SUMO标签蛋白单抗100μLXY130592HRP标记内参抗体30μLXY131202即用型GFP标签蛋白裂解液100uLXY130413肝素琼脂糖5mL|50mLXY130417蓝胶琼脂糖5mL|50mLXY130421DEAE交换介质50mLXY130423Q交换介质50mLXY130422CM交换介质50mLXY130424SP交换介质50mLXY131020Sephacryl S-400基质10mLXY130425苯基介质50mLXY130426丁基介质50mLXY130427丁基硫介质50mLXY130418Protein A琼脂糖1mLXY130420Protein G琼脂糖1mLXY131201Protein A+G琼脂糖2mLXY100939福林酚试剂100mLXY90610卵白蛋白标准品1mLXY131070牛血清白蛋白标准品1mLXY131071牛血清γ 球蛋白标准品1mLXY131072预稀释BSA 蛋白标准品1mLXY131220预稀释BGG 蛋白标准品1mLXY131074SDS-PAGE 样品预处理试剂盒50次XY131122考马斯亮蓝R-25010gXY131123考马斯亮蓝G-25010gXY131078天然蛋白A1mgXY131079重组蛋白A1mgXY131080重组蛋白G1mgXY131081重组蛋白A/G1mgXY131082重组蛋白L1mgXY131075糖蛋白染色试剂盒10次XY131076磷酸蛋白染色试剂盒10次