Trimethyl carbinol技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链，随之将反应混合物冷却至某一温度，这一温度可使引物与它的靶序列发生退火，再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Trimethyl carbinol这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环，PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
Trimethyl carbinol根据客户的实验目的，进行PCR反应的优化。
1、变性：高温使双链DNA解离形成单链（94℃，30s）。
2、退火：低温下，引物与模板DNA互补区结合（55℃，30s）。
3、延伸：中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应（70～72℃，30～60s）。
Trimethyl carbinol以上述叁个步骤为一个循环，每一循环的产物均可作为下一个循环的模板，经过n次循环后，目的DNA以2n的形式增加。
叁、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板（质粒、基因组DNA、PCR产物等），或者提供样品，我们制备模板。
2、引物设计
Trimethyl carbinol客户提供上、下游引物，或者提供目的基因的相关信息（基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等），我公司提供免费的引物设计及合成。XY3401 TUREscript One Step RT-PCR Kit(一步法反转录PCR试剂盒) 50次×50μl/100次×50μl XY4501 THERMOscript One Step RT-PCR Kit(一步法耐热反转录PCR试剂盒) 50次×50μl/100次×50μl XY4801 miRNA cDNA **链合成试剂盒 25次 XY4901 miRNA 荧光定量PCR检测试剂盒 50次×50μl XY2001 长片段PCR扩增试剂盒 100次/500次 XY2101 高保真PCR扩增试剂盒 100次/500次 XY0101 pSURE-T 载体连接试剂盒 20次/60次/20次(带T4ligase)/60次(带T4ligase) XY0201 pSURE -T Simple 载体连接试剂盒 20次/60次/20次(带T4ligase)/60次(带T4ligase) XY0301 pGEMX -T Easy 载体连接试剂盒 20次/60次/20次(带T4ligase)/60次(带T4ligase) XY0401 pBLUE-T 载体连接试剂盒 20次/60次/20次(带T4ligase)/60次(带T4ligase) XY0501 通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒 80次-100次/400次-500次 XY0601 平末端DNA加A试剂盒 25次/50次 XY0801 高效感受态细胞制备试剂盒 100×100μl/200×100μl/400×100μl XY0101 BCA蛋白定量试剂盒 200次/500次/2500次/5000次 XY0201 Bradford法蛋白定量试剂盒 250次/1000次/2500次 XY0401 超敏可逆蛋白染色试剂盒 250ml/1L XY0501 新型快速蛋白染色试剂盒 20次/60次 XY0601 加热型快速考马斯亮兰染色液 250ml/500ml/2000ml XY0701 蛋白印迹膜再生液Stripping Buffer 6次/12次/40次 XY0801 超敏可逆蛋白印迹膜染色试剂盒I 100ml/250ml