Collodion wool技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链，随之将反应混合物冷却至某一温度，这一温度可使引物与它的靶序列发生退火，再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Collodion wool这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环，PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
Collodion wool根据客户的实验目的，进行PCR反应的优化。
1、变性：高温使双链DNA解离形成单链（94℃，30s）。
2、退火：低温下，引物与模板DNA互补区结合（55℃，30s）。
3、延伸：中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应（70～72℃，30～60s）。
Collodion wool以上述叁个步骤为一个循环，每一循环的产物均可作为下一个循环的模板，经过n次循环后，目的DNA以2n的形式增加。
叁、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板（质粒、基因组DNA、PCR产物等），或者提供样品，我们制备模板。
2、引物设计
Collodion wool客户提供上、下游引物，或者提供目的基因的相关信息（基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等），我公司提供免费的引物设计及合成。5mLXY131043CHAPS5gXY131044辛甲基β 葡糖苷1gXY131045辛甲基硫吡喃葡萄糖苷5gXY131046n-十二烷基-β-D-麦芽糖苷1gXY131047脱氧胆酸钠5gXY131048胆酸钠5gXY131049十二烷基磺酸钠100gXY131050去垢剂去除树脂10mLXY131051十二烷基磺酸钠**剂25mLXY131052β- 巯基乙醇，蛋白级10mLXY131053蛋白级DTT5gXY131054免称量蛋白级DTT48管XY131055TCEP 盐酸膦1gXY131056TCEP 溶液5mLXY131120盐酸胍溶液200mLXY131222咪唑溶液100mLXY131058咪唑25gXY131059亚氨二乙酸介质10mLXY131061谷胱甘肽S 转移酶1mgXY81216核酸**剂1.5mLXY81029非变性法蛋白沉淀试剂盒10次XY81217微量蛋白沉淀试剂盒50次XY61205血清白蛋白**剂15次XY100915SDS-PAGE预制胶12块XY80810一站式SDS-PAGE电泳套装30次XY100867SDS-PAGE浓缩胶配胶液500mLXY100868SDS-PAGE分离胶配胶液500mLXY81204SDS-PAGE上样液10mLXY81203SDS-PAGE电泳液5L|20LXY100908一站式长效期SDS-PAGE电泳套装30次(A)|30次(B)XY100909长效期SDS-PAGE配胶液200mLXY100910长效期SDS-PAGE还原剂10mLXY100911长效期SDS-PAGE上样液1mLXY100912长效期SDS-PAGE电泳液(干粉)20L(A)XY81205一站式Tricine-SDS-PAGE套装30次XY81225Tricine-SDS-PAGE配胶液250mL|1000mLXY81213Tricine-SDS-PAGE上样液1mL|5mLXY81214Tricine-SDS-PAGE阳极电泳液(干粉)10L|50LXY81226Tricine-SDS-PAGE阴极电泳液(干粉)10L|50LXY81212一站式蛋白非变性PAGE套装30次(A)|30次(B)|30次(C)XY100828高pH缓冲液套装30次XY100829中pH缓冲液套装30次XY100830低pH缓冲液套装30次XY70102蛋白质电泳分子量标准15次(A)|20次(B)|10次(C)XY70704预染蛋白质电泳分子量标准10次(A)|10次(B)XY90402蛋白胶微量回收试剂盒50次XY90403蛋白胶中量回收试剂盒5次XY80812考马斯亮蓝染液250mLXY61204一步式PAGE染液10次XY111203绿如蓝蛋白染液250次XY100810超快蛋白银染试剂盒1000mLXY100811质谱兼容型蛋白银染试剂盒10次XY100603银染**剂30次XY81215一站式Western印迹套装(显色法)20次(A)|20次(B)XY131104Western 封堵液500mLXY131105酪蛋白封堵液100mL(A)|100mL(B)XY131236牛血清白蛋白封堵液250mLXY131109Tris 缓冲盐溶液(TBS)10包XY131112氯萘酚溶液50mLXY131114ABTS 溶液50mlXY131115OPD 干粉25gXY131116pNPP 干粉1gXY131108ONPG 干粉1gXY101122尼龙膜1张XY101123PVDF膜1张XY81206氨基黑染膜液250mLXY100924丽春红S染膜液250mLXY100928湿法电转液(干粉)20LXY81207半干法电转液(干粉)20LXY100878Western印迹膜封膜液100mLXY81208印迹膜抗体稀释液