DNA提取 ：一、AcMNPV E2实验原理
DNA是遗传信息的载体，是*重要的生物信息分子，因此DNA的提取也是分子生物学实验技术中*重要、*基本的操作之一。我公司提供从各种不同来源的样品（如**、**、血液、培养细胞、动物组织及植物组织等）中提取高纯度基因组DNA的服务。
二、实验步骤
1、细胞裂解
● CTAB法 CTAB（hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基**基溴化铵）是一种阳离子去污剂，可融解细胞膜，并与核酸形成符合物。该复合物在高盐溶液中（>0.7M NaCl）是可溶的，AcMNPV E2通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。此法多用于植物组织、**等材料。
● SDS法 SDS是一种阴离子去污剂，高温（55℃-65℃）下可裂解细胞，使蛋白变性、染色体解析。常用于血液、**、酵母、动物组织、细胞等样品基因组DNA的提取。
● 其他方法 物理方法如机械剪切、超声波破碎、匀浆等，化学方法如异硫氰酸胍、碱裂解、蛋白酶K消化等。
2、DNA分离纯化
● 用酚/氯仿抽提裂解液，收集水相，乙醇沉淀DNA，*后用TE溶解DNA沉淀。
3、DNA的定量及检测
● AcMNPV E2琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段的分子质量。
● 紫外分光光度计检测DNA浓度 DNA在OD260处有显着吸收峰，OD260值为1相当于大约50ug/ml双链DNA。提取的基因组DNA样品浓度＝OD260×50ug/ml×稀释倍数。
● 紫外分光光度计检测DNA纯度
一般用OD260/OD280值检测DNA样品的纯度。OD260/OD280值约为1.7-1.9，说明DNA纯度较好；若小于1.7有可能有蛋白污染；若大于2.0，说明有RNA污染或DNA已经降解。
叁、AcMNPV E2样品处理
因细胞结构及所含成分不同，样品预处理的方法也有差异。不同样品的预处理方法大致如下：
● 植物组织——液氮研磨
● 动物组织——匀浆、液氮研磨
● 培养细胞——蛋白酶K消化
● 细 菌——溶菌酶消化
● 酵 母——Lyticase消化、玻璃珠破碎
AcMNPV E2注意：客户*好提供新鲜的样品或取样后立即在低温（-20℃或-70℃）冷冻保存的样品，避免反复冻溶。XY013 EB病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY014 手足口病EV71型/CoxA16型病毒核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48 XY015 单纯疱疹/巨细胞病毒核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48 XY016 手足口病EV-U/EV71型/CoxA16型病毒核酸三色荧光PCR检测试剂盒 48 XY017 腮腺炎/乙脑/肠道病毒核酸三色荧光PCR检测试剂盒 48 XY018 登革热病毒通用核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY019 登革热病毒Ⅰ型核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY020 登革热病毒Ⅱ型核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY021 登革热病毒Ⅲ型核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY022 登革热病毒Ⅳ型核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY023 黄热病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY024 西尼罗病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY025 基孔肯雅病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY026 马尔堡病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY027 裂谷热病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY028 东部马脑炎病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY029 西部马脑炎病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY030 委内瑞拉马炎病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY031 Nipah病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY032 辛诺柏病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48