DNA提取 ：一、Kosmotoga shengliensis medium实验原理
DNA是遗传信息的载体，是*重要的生物信息分子，因此DNA的提取也是分子生物学实验技术中*重要、*基本的操作之一。我公司提供从各种不同来源的样品（如**、**、血液、培养细胞、动物组织及植物组织等）中提取高纯度基因组DNA的服务。
二、实验步骤
1、细胞裂解
● CTAB法 CTAB（hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基**基溴化铵）是一种阳离子去污剂，可融解细胞膜，并与核酸形成符合物。该复合物在高盐溶液中（>0.7M NaCl）是可溶的，Kosmotoga shengliensis medium通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。此法多用于植物组织、**等材料。
● SDS法 SDS是一种阴离子去污剂，高温（55℃-65℃）下可裂解细胞，使蛋白变性、染色体解析。常用于血液、**、酵母、动物组织、细胞等样品基因组DNA的提取。
● 其他方法 物理方法如机械剪切、超声波破碎、匀浆等，化学方法如异硫氰酸胍、碱裂解、蛋白酶K消化等。
2、DNA分离纯化
● 用酚/氯仿抽提裂解液，收集水相，乙醇沉淀DNA，*后用TE溶解DNA沉淀。
3、DNA的定量及检测
● Kosmotoga shengliensis medium琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段的分子质量。
● 紫外分光光度计检测DNA浓度 DNA在OD260处有显着吸收峰，OD260值为1相当于大约50ug/ml双链DNA。提取的基因组DNA样品浓度＝OD260×50ug/ml×稀释倍数。
● 紫外分光光度计检测DNA纯度
一般用OD260/OD280值检测DNA样品的纯度。OD260/OD280值约为1.7-1.9，说明DNA纯度较好；若小于1.7有可能有蛋白污染；若大于2.0，说明有RNA污染或DNA已经降解。
叁、Kosmotoga shengliensis medium样品处理
因细胞结构及所含成分不同，样品预处理的方法也有差异。不同样品的预处理方法大致如下：
● 植物组织——液氮研磨
● 动物组织——匀浆、液氮研磨
● 培养细胞——蛋白酶K消化
● 细 菌——溶菌酶消化
● 酵 母——Lyticase消化、玻璃珠破碎
Kosmotoga shengliensis medium注意：客户*好提供新鲜的样品或取样后立即在低温（-20℃或-70℃）冷冻保存的样品，避免反复冻溶。30μLXY131202即用型GFP标签蛋白裂解液100uLXY130413肝素琼脂糖5mL|50mLXY130417蓝胶琼脂糖5mL|50mLXY130421DEAE交换介质50mLXY130423Q交换介质50mLXY130422CM交换介质50mLXY130424SP交换介质50mLXY131020Sephacryl S-400基质10mLXY130425苯基介质50mLXY130426丁基介质50mLXY130427丁基硫介质50mLXY130418Protein A琼脂糖1mLXY130420Protein G琼脂糖1mLXY131201Protein A+G琼脂糖2mLXY100939福林酚试剂100mLXY90610卵白蛋白标准品1mLXY131070牛血清白蛋白标准品1mLXY131071牛血清γ 球蛋白标准品1mLXY131072预稀释BSA 蛋白标准品1mLXY131220预稀释BGG 蛋白标准品1mLXY131074SDS-PAGE 样品预处理试剂盒50次XY131122考马斯亮蓝R-25010gXY131123考马斯亮蓝G-25010gXY131078天然蛋白A1mgXY131079重组蛋白A1mgXY131080重组蛋白G1mgXY131081重组蛋白A/G1mgXY131082重组蛋白L1mgXY131075糖蛋白染色试剂盒10次XY131076磷酸蛋白染色试剂盒10次XY131077组氨酸标签蛋白染色试剂盒10次XY80814Bradford法蛋白定量试剂盒100mL|200mLXY80815BCA法蛋白定量试剂盒500次XY80816超敏型BCA法蛋白定量试剂盒500次XY131069还原剂兼容型BCA蛋白定量试剂盒250次XY101102改良Lowry法蛋白定量试剂盒1000次XY80808蛋白酶抑制剂混合液2×0.5mLXY80809蛋白磷酸酶抑制剂混合液11mLXY130525蛋白磷酸酶抑制剂混合液25mLXY130526**专用蛋白酶抑制剂10mLXY130527哺乳动物专用蛋白酶抑制剂1mLXY130528植物专用蛋白酶抑制剂1mLXY130529酵母专用蛋白酶抑制剂5mLXY130530His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mLXY130531组织培养专用蛋白酶抑制剂1mLXY130543α2巨球蛋白